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植物组培中外植体如何灭菌?

时间:2016-09-05来源:http://www.zupeiwang.net/news/143.html

植物组培是科技技术的一种方式,是在人工的手段下在适当的条件下加以培养,使它们能够生长、发育、分化与增殖的技术。植物组织培养能够以少量的母体培养出大量的植物,这使植物组织培养有许多的用途,例如基础植物学与遗传学研究,以及农业上的育种与品种保留。接下来我们来了解一下植物组培中外植体如何灭菌?

植物组培灭菌技巧

植物组培灭菌技巧

第一步 清洗外植体

切取材料的幼茎或尚未完全展开的叶片,浸入稀释的肥皂液中浸泡,再用软刷轻轻刷洗外植体的表面,清除附着在外植体表面的尘土和部分菌体,然后用自来水冲洗,出去肥皂液和污物。这样处理可除去外植体表面90%的微生物。

第二步 75%乙醇灭菌

酒精浓度应该视外植体表面的干湿而定,表面湿润的外植体可以将浓度提高到80%;乙醇的用量一般为外植体体积的10倍以上;灭菌时间应严格控制在10-30秒。

第三步,0.1%氯化汞灭菌灭菌

时间的长短依照材料的带菌情况而定,通常在5-15分钟。灭菌时进行搅动,使植物材料与灭菌剂有良好的接触。若在氯化汞中加入几滴吐温-80,可以降低表面张力,提高杀菌效力。

第四步 无菌水漂洗

经过灭菌的外植体,要用无菌水冲洗;如果用氯化汞灭菌的,必须彻底除去残留的汞离子,否则外植体会受到明显的伤害。

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